Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con Sonda – per analisi RNA in tempo reale

Il Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con sonda è una soluzione pronta e ottimizzata per applicazioni di RT-qPCR one-step, cioè per eseguire trascrizione inversa e PCR quantitativa in tempo reale all’interno della stessa provetta.

È indicato per laboratori di biologia molecolare, genetica, microbiologia molecolare, virologia, diagnostica molecolare, ricerca universitaria, biotecnologie e controllo qualità che necessitano di analizzare target RNA con un workflow rapido, sensibile e riproducibile.

Il kit comprende un MasterMix 2X per realizzare PCR in tempo reale ed è compatibile con la maggior parte delle tecnologie di sonda. Include inoltre una miscela RT, formulata per supportare la sintesi di cDNA e proteggere l’RNA durante la reazione.

RT-qPCR One-Step: retrotrascrizione e qPCR nello stesso tubo

La tecnologia one-step RT-qPCR permette di eseguire in un’unica reazione due passaggi fondamentali:

• conversione dell’RNA in cDNA tramite trascrizione inversa;
• amplificazione e quantificazione del target mediante qPCR con sonda.

Rispetto a un protocollo two-step, dove prima si sintetizza il cDNA e poi si prepara una seconda reazione qPCR, il sistema one-step riduce manipolazioni, tempi operativi e rischio di contaminazione.

In pratica: meno aperture di tubo, meno pipettaggi, meno possibilità che il banco laboratorio decida di trasformarsi in una crime scene molecolare.

Ideale per analisi RNA, virus e target molecolari specifici

Il Kit qLUMEN One-Step è pensato per analisi basate su RNA come materiale di partenza. È particolarmente utile quando il laboratorio deve rilevare o quantificare target RNA mediante sonde fluorescenti.

Può essere utilizzato in workflow come:

• analisi di espressione genica;
• rilevazione di RNA virale;
• studi di microbiologia molecolare;
• analisi di target RNA specifici;
• validazione di saggi molecolari;
• controllo qualità;
• ricerca in biologia molecolare;
• diagnostica molecolare secondo protocollo interno.

La combinazione tra RT e qPCR nello stesso tubo rende il prodotto adatto a workflow dove rapidità, sensibilità e riduzione delle manipolazioni sono aspetti centrali.

Compatibile con tecnologie di sonda

Il kit è progettato per qPCR con sonda fluorescente ed è compatibile con la maggior parte delle tecnologie di sonda.

Le sonde aumentano la specificità della rilevazione perché il segnale fluorescente dipende non solo dall’amplificazione del target, ma anche dal riconoscimento della sequenza specifica da parte della sonda.

Questo rende il sistema particolarmente indicato quando è necessario distinguere target specifici, ridurre la possibilità di interpretare prodotti aspecifici e ottenere risultati più affidabili rispetto ai sistemi basati solo su coloranti intercalanti.

MasterMix 2X per PCR real-time

Il kit include un MasterMix fornito a concentrazione 2X per la PCR in tempo reale.

La formulazione 2X semplifica la preparazione della reazione: l’operatore aggiunge RNA modello, primer, sonda e gli altri componenti previsti dal protocollo, mantenendo una base di reazione già ottimizzata e standardizzata.

Questo riduce il numero di passaggi manuali e migliora la riproducibilità tra campioni, operatori e sessioni di lavoro.

Miscela RT con inibitori di RTasi e RNasi

La scheda Labbox indica che il kit include una miscela RT con una miscela equilibrata di componenti per la retrotrascrizione e inibitori di RNasi.

Questo è un aspetto importante perché l’RNA è una molecola delicata e facilmente degradabile. La presenza di componenti dedicati alla fase RT e alla protezione dell’RNA aiuta a mantenere la qualità del campione durante la reazione.

Quando si lavora con RNA, anche piccole contaminazioni da RNasi possono compromettere resa, sensibilità e riproducibilità. Quindi sì: qui la protezione dell’RNA non è un dettaglio, è praticamente la cintura di sicurezza.

Disponibile con ROX™ alto e ROX™ basso

Il Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con sonda è disponibile in due versioni, entrambe per 100 test/reazioni:

La scelta tra ROX™ alto e ROX™ basso dipende dallo strumento real-time PCR utilizzato. Il ROX viene impiegato come riferimento passivo in diverse piattaforme qPCR per normalizzare variazioni di fluorescenza non legate all’amplificazione.

Differenza tra RT-qPCR One-Step e qPCR classica

La qPCR classica lavora generalmente su DNA o cDNA già preparato. Quindi, se il campione di partenza è RNA, serve prima una fase separata di retrotrascrizione.

La RT-qPCR One-Step, invece, consente di partire direttamente dall’RNA e completare nello stesso tubo sia la sintesi del cDNA sia la qPCR.

In sintesi:

Il formato one-step è particolarmente utile quando si devono processare molti campioni, ridurre contaminazioni e velocizzare il workflow.

Applicazioni principali

Il Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con sonda è indicato per:

• RT-qPCR one-step;
• real-time PCR da RNA;
• sintesi di cDNA e qPCR nello stesso tubo;
• analisi di espressione genica;
• rilevazione di RNA virale;
• quantificazione di target RNA;
• microbiologia molecolare;
• virologia molecolare;
• genetica molecolare;
• ricerca universitaria;
• biotecnologie;
• controllo qualità;
• diagnostica molecolare secondo protocollo interno.

Caratteristiche tecniche principali

Perché scegliere il Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con sonda

Il Kit qLUMEN One-Step per RT-qPCR con sonda è una scelta ideale per laboratori che cercano una soluzione rapida e affidabile per analisi quantitative a partire da RNA.

I principali vantaggi sono:

• consente RT e qPCR nello stesso tubo;
• riduce tempi e manipolazioni;
• diminuisce il rischio di contaminazione;
• utilizza tecnologia con sonda per maggiore specificità;
• compatibile con la maggior parte delle tecnologie di sonda;
• include MasterMix 2X per PCR real-time;
• include miscela RT;
• disponibile con ROX™ alto o ROX™ basso;
• formato da 100 test;
• trasporto refrigerato.

Rispetto a un sistema qPCR standard, questo kit è più indicato quando il materiale di partenza è RNA e si desidera combinare retrotrascrizione e quantificazione in un unico workflow.