MasterMix qLUMEN per qPCR 2X con Colorante Verde – per PCR Real-Time

Il MasterMix qLUMEN per qPCR 2X con colorante verde è una miscela pronta all’uso progettata per applicazioni di PCR quantitativa in tempo reale, o qPCR, basate su un colorante fluorescente verde analogo a SYBR® Green.

È indicato per laboratori di biologia molecolare, genetica, microbiologia, diagnostica molecolare, biotecnologie, ricerca universitaria e controllo qualità che necessitano di un reagente pratico, sensibile e riproducibile per amplificazioni real-time.

Il MasterMix include tutti i componenti necessari alla reazione qPCR, ad eccezione di primer e modello, semplificando la preparazione della miscela e riducendo il numero di pipettaggi. La formulazione 2X permette di preparare rapidamente la reazione finale, rendendo il prodotto adatto sia ad applicazioni di routine sia a workflow con più campioni o repliche tecniche.

MasterMix qPCR con colorante verde

Il MasterMix qLUMEN con colorante verde utilizza una tintura fluorescente che si lega al DNA a doppio filamento prodotto durante l’amplificazione. Con l’aumentare del prodotto PCR, aumenta anche il segnale fluorescente rilevato dallo strumento real-time PCR.

Questa tecnologia è molto utilizzata perché consente di monitorare l’amplificazione in tempo reale senza dover progettare una sonda specifica per ogni target.

È particolarmente adatta per:

• quantificazione relativa;
• analisi di espressione genica su cDNA;
• validazione di primer;
• controllo di amplificazione;
• analisi di curve di melting;
• screening di target;
• qPCR di routine;
• ricerca e sviluppo.

In pratica: rispetto alla qPCR con sonda, qui hai un setup più snello. Meno componenti da progettare, meno sbatti iniziale, ma sempre con la necessità di controllare bene la specificità dell’amplicone.

Formulazione 2X pronta all’uso

La formulazione 2X consente di velocizzare il setup della qPCR e migliorare la standardizzazione tra campioni diversi.

Il laboratorio deve aggiungere:

• primer forward;
• primer reverse;
• DNA o cDNA modello;
• acqua nuclease-free, secondo volume finale.

Questo formato è molto utile quando si lavora con piastre da 96 pozzetti, serie multiple di campioni o repliche tecniche, perché riduce la variabilità operativa e limita gli errori di preparazione.

Il prodotto include tutti i componenti necessari per la reazione qPCR, esclusi primer e modello.

Colorante verde analogo a SYBR® Green

Il MasterMix qLUMEN utilizza un colorante fluorescente verde analogo a SYBR® Green, adatto al monitoraggio della PCR in tempo reale.

Questo sistema rileva l’accumulo di DNA a doppio filamento durante la reazione. È una soluzione molto pratica per qPCR perché non richiede sonde fluorescenti specifiche e può essere utilizzata con primer progettati per il target di interesse.

Il vantaggio principale è la versatilità: lo stesso MasterMix può essere usato per molti target diversi, cambiando soltanto i primer e il modello.

Importanza della curva di melting

Nelle qPCR basate su colorante verde, la specificità della reazione deve essere verificata con attenzione, perché il colorante si lega al DNA a doppio filamento in generale, non solo al target corretto.

Per questo motivo è importante eseguire una curva di melting al termine della reazione, così da controllare la presenza di un singolo prodotto specifico ed escludere amplificazioni aspecifiche o primer-dimer.

Una curva di melting pulita aiuta a confermare che il segnale fluorescente derivi dall’amplicone desiderato e non da prodotti secondari. In sostanza: il colorante verde è pratico e veloce, ma la melting curve è il buttafuori che controlla chi è entrato davvero nella festa.

Disponibile con ROX™ alto, ROX™ basso o senza ROX™

Il MasterMix qLUMEN con colorante verde è disponibile in tre versioni, pensate per adattarsi a diverse piattaforme real-time PCR.

Il ROX™ è un riferimento passivo utilizzato da alcuni strumenti qPCR per normalizzare variazioni di fluorescenza non legate all’amplificazione. La scelta tra ROX alto, ROX basso o senza ROX dipende dallo strumento real-time PCR utilizzato e dalle indicazioni del produttore dello strumento.

Ideale per analisi qPCR di routine

Il MasterMix qLUMEN con colorante verde è indicato per laboratori che cercano una soluzione semplice e versatile per qPCR.

Può essere utilizzato per:

• analisi di espressione genica;
• quantificazione relativa;
• quantificazione di DNA o cDNA;
• validazione di primer;
• controllo di qualità degli amplificati;
• screening molecolare;
• analisi comparative tra campioni;
• ricerca universitaria;
• microbiologia molecolare;
• biotecnologie;
• diagnostica molecolare secondo protocolli interni.

È particolarmente utile quando il laboratorio lavora su più target e vuole evitare la progettazione di sonde specifiche per ogni saggio.

Differenza tra qPCR con colorante verde e qPCR con sonda

Il MasterMix con colorante verde è più versatile e conveniente nella fase di sviluppo del metodo, perché richiede solo primer e modello. È ideale per screening, validazione primer, espressione genica e qPCR di routine.

Il MasterMix con sonda, invece, offre maggiore specificità perché il segnale dipende anche dal legame della sonda alla sequenza target. È preferibile quando serve una discriminazione più selettiva, ad esempio in saggi altamente specifici o target complessi.

Tradotto semplice:
colorante verde = più flessibile e rapido da impostare;
sonda = più specifica e controllata.

Applicazioni principali

Il MasterMix qLUMEN per qPCR 2X con colorante verde è indicato per:

• qPCR;
• real-time PCR;
• analisi con colorante verde tipo SYBR® Green;
• quantificazione di DNA;
• quantificazione di cDNA;
• analisi di espressione genica;
• validazione di primer;
• curva di melting;
• screening di target molecolari;
• microbiologia molecolare;
• genetica molecolare;
• biotecnologie;
• controllo qualità;
• ricerca universitaria.

Caratteristiche tecniche principali

Perché scegliere il MasterMix qLUMEN con colorante verde

Il MasterMix qLUMEN per qPCR 2X con colorante verde è una scelta ideale per laboratori che cercano un reagente qPCR pratico, versatile e pronto all’uso.

I principali vantaggi sono:

• formulazione 2X pronta all’uso;
• indicato per qPCR e real-time PCR;
• utilizza colorante verde analogo a SYBR® Green;
• richiede solo aggiunta di primer e modello;
• non richiede sonda specifica;
• disponibile con ROX™ alto, ROX™ basso o senza ROX™;
• adatto a diversi strumenti real-time PCR;
• utile per analisi di espressione genica;
• indicato per validazione primer e screening;
• formato 2 x 1,25 ml / 100 reazioni;
• trasporto refrigerato.

Rispetto alla qPCR con sonda, la versione con colorante verde è particolarmente indicata quando si cerca una soluzione più semplice da impostare e più flessibile per target diversi.