rNEAT Kit per l’Estrazione di RNA Virale – 100 test

Il rNEAT Kit per l’estrazione di RNA virale è una soluzione progettata per la rapida purificazione dell’RNA virale da campioni privi di cellule, come siero, plasma, urine, fluidi corporei acellulari, supernatanti di colture cellulari e liquidi di lavaggio provenienti da campioni di tamponamento.

È indicato per laboratori di biologia molecolare, microbiologia, virologia, ricerca universitaria, biotecnologie, controllo qualità e diagnostica molecolare che necessitano di ottenere RNA virale purificato e pronto per applicazioni successive come RT-PCR e qRT-PCR.

Il kit utilizza un sistema di purificazione su base di silice, in cui le molecole di RNA virale si legano al supporto mentre impurità come proteine e nucleasi vengono rimosse mediante lavaggi accurati. L’RNA viene infine eluito in acqua sterile libera da RNasi, risultando pronto per le successive analisi molecolari.

Estrazione rapida di RNA virale da campioni privi di cellule

Il kit rNEAT è progettato per l’isolamento dell’RNA virale da campioni acellulari, cioè matrici biologiche o liquidi in cui il materiale virale può essere presente senza una componente cellulare significativa.

Può essere utilizzato con:

• siero;
• plasma;
• urine;
• fluidi corporei privi di cellule;
• supernatanti di colture cellulari;
• liquido di lavaggio di campioni da tampone.

Questa versatilità rende il kit adatto a diversi contesti di laboratorio in cui è necessario recuperare RNA virale da matrici biologiche liquide o da campioni derivati da tamponamento.

Purificazione su silice per RNA virale

Il principio del kit si basa sul legame delle molecole di RNA virale a una matrice di silice.

Durante la procedura, il campione viene trattato in modo da favorire il legame dell’RNA al supporto. Le impurità, come proteine, nucleasi e altri componenti potenzialmente interferenti, vengono rimosse tramite lavaggi con appositi tamponi.

Questa tecnologia consente di ottenere un RNA più pulito e adatto alle applicazioni downstream, riducendo la presenza di sostanze che potrebbero interferire con enzimi, primer, sonde o reazioni di amplificazione.

Rimozione di proteine e nucleasi

Uno degli aspetti più importanti dell’estrazione dell’RNA virale è la rimozione di contaminanti e nucleasi.

Le nucleasi possono degradare gli acidi nucleici e compromettere la qualità del campione, mentre proteine e altri residui possono interferire con le reazioni molecolari successive.

Il kit rNEAT prevede lavaggi accurati che aiutano a eliminare queste impurità, migliorando la qualità dell’RNA purificato e rendendolo più adatto ad applicazioni sensibili come RT-PCR e qRT-PCR.

In pratica: qui l’obiettivo è portare l’RNA fuori dal caos del campione e metterlo in condizioni “presentabili” per la PCR. Perché la qPCR, come sempre, non perdona.

Eluizione in acqua sterile libera da RNasi

L’RNA virale purificato viene eluito in acqua sterile libera da RNasi, condizione importante per preservare l’integrità del campione dopo la purificazione.

L’assenza di RNasi nell’acqua di eluizione contribuisce a ridurre il rischio di degradazione dell’RNA durante la fase finale del protocollo e nella successiva manipolazione del campione.

Una volta isolato, l’RNA virale è pronto per l’uso nelle applicazioni previste e deve essere conservato a -70 °C, secondo quanto indicato nella scheda prodotto.

RNA portante per migliorare il recupero a basse concentrazioni

Il kit include anche RNA portante, utile per migliorare il legame e il recupero dell’RNA virale quando questo è presente a bassa concentrazione.

Questa caratteristica è particolarmente importante nei campioni con carica virale ridotta o con quantità limitate di acido nucleico, dove il recupero efficiente dell’RNA può fare la differenza nella riuscita delle analisi successive.

L’RNA portante contribuisce quindi a rendere il processo più efficace nei casi in cui il materiale virale disponibile è scarso.

Adatto per RT-PCR e qRT-PCR

L’RNA purificato con il kit rNEAT è indicato per applicazioni di RT-PCR e qRT-PCR.

Queste tecniche sono fondamentali nei laboratori che lavorano con RNA virale, perché consentono di convertire l’RNA in cDNA mediante trascrizione inversa e successivamente amplificare o quantificare specifici target molecolari.

Un RNA pulito, privo di inibitori e ben conservato è essenziale per ottenere risultati affidabili in amplificazione e quantificazione.

Utilizzabile per un’ampia gamma di virus

La procedura può essere impiegata per l’isolamento dell’RNA virale da un’ampia gamma di virus. Tuttavia, come indicato nella scheda tecnica, il rendimento non può essere garantito per tutte le specie virali e deve essere validato dal laboratorio in base al campione e al target analizzato.

La resa finale dell’RNA può dipendere da diversi fattori, tra cui:

• tipo di campione;
• origine del campione;
• modalità di trasporto;
• condizioni di conservazione;
• età del campione;
• concentrazione virale iniziale.

Questa nota è importante perché rende la descrizione più tecnica e corretta, evitando promesse troppo “magiche” da brochure anni 2000.

Formato da 100 test

Il kit è disponibile con referenza PURK-RNV-100 nel formato da 100 test. La scheda prodotto indica che l’RNA purificato è adatto per RT-PCR e qRT-PCR.

Questo formato è adatto a laboratori che processano serie di campioni, attività di ricerca, validazioni, controlli molecolari o workflow periodici su campioni destinati all’estrazione di RNA virale.

Applicazioni principali

Il rNEAT Kit per l’estrazione di RNA virale è indicato per:

• estrazione di RNA virale;
• purificazione RNA da siero;
• purificazione RNA da plasma;
• purificazione RNA da urine;
• purificazione RNA da fluidi corporei privi di cellule;
• purificazione RNA da supernatanti di colture cellulari;
• purificazione RNA da liquidi di lavaggio di tamponi;
• preparazione RNA per RT-PCR;
• preparazione RNA per qRT-PCR;
• virologia molecolare;
• microbiologia molecolare;
• ricerca e sviluppo;
• controllo qualità;
• diagnostica molecolare, secondo i protocolli interni del laboratorio.

Caratteristiche tecniche principali

Perché scegliere il rNEAT Kit per l’estrazione di RNA virale

Il rNEAT Kit per l’estrazione di RNA virale è una scelta ideale per laboratori che cercano un sistema rapido e affidabile per purificare RNA virale da campioni privi di cellule.

I principali vantaggi sono:

• progettato per RNA virale;
• adatto a siero, plasma, urine e fluidi corporei acellulari;
• utilizzabile con supernatanti di colture cellulari;
• compatibile con liquidi di lavaggio da tamponi;
• purificazione su silice;
• rimozione di proteine e nucleasi;
• eluizione in acqua sterile libera da RNasi;
• RNA portante incluso per migliorare il recupero a basse concentrazioni;
• RNA purificato adatto per RT-PCR e qRT-PCR;
• formato da 100 test;
• trasporto refrigerato.

Rispetto a un kit generico per RNA totale, il rNEAT per RNA virale è più indicato quando il campione è privo di cellule e l’obiettivo è recuperare RNA virale anche in quantità ridotte.